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大鼠5核苷酸酶(5-NT)酶聯免疫試劑盒
產品編號:YEF24379
產品名稱 大鼠5核苷酸酶(5-NT)酶聯免疫試劑盒 
編號 YEF24379 
大鼠5核苷酸酶(5-NT)酶聯免疫試劑盒
本試劑盒只能用于科 學研究,不得用于醫學診斷,具體各指標使用說明書請聯系客服索取,本模板為通用模板,僅供參考。

試劑盒檢測原理:
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被樣本 抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。
用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最 終的黃色。
顏色的深淺和樣品中的樣本呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保 存方法
1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何 細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3.  細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20 ℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1.酶標儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
操作注意事項
1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬 于正常現象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2.  實驗中不 用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.  濃度為0的 S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,最終結果乘以5才是樣本實 際濃度。
4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順 序進行溫育操作。
5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成 
名稱                   96孔配置      48孔配置     備注
微孔酶標板         12孔×8條     12孔×4條    無
樣本稀釋液         6mL              3mL           無
檢測抗體-HRP    10mL            5mL           無
20×洗滌緩沖液   25mL           15mL          按說明 書進行稀釋
底物A                 6mL             3mL            無
底物B                 6mL             3mL            無
終止液                6mL             3mL            無
封板膜                2張               2張             無
說明書                1份               1份             無
自封袋                1個               1個             無
注:標準品濃度都不相同,麻煩聯系客服索取相應說明書
試劑的準備:
20×洗滌緩沖液的稀 釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法
1.  手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液 ,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2.  自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步驟
1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板 條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.  設置標準 品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.  樣本孔先 加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4.  除空白孔 外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔 ,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.  棄去液體 ,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用 洗板機洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育 15min。
7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm 波長處測定各孔的OD值。
結果判斷
 繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準 品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

試劑盒性能
1. 準確性:標準品 線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:最低檢 測濃度小于(參考說明書)
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反 應。
4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個月
免責聲明
1.  試劑盒僅 供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。
    嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者 承擔。
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所有的產品和服務只應用于科學研究,不得用于人體,我們不提供產品和服務給任何個人   
主要銷售elisa試劑盒、酶免試劑盒,獨腳金內酯,溶血素,牛血清白蛋白,小鼠ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒 
技術支持:chem960化工網——做最好用的化工網
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